各省、自治區(qū)、直轄市衛(wèi)生廳(局),新疆生產(chǎn)建設(shè)兵團(tuán)衛(wèi)生局:
經(jīng)專家論證并經(jīng)我部審核同意,現(xiàn)將《出、凝血時間檢驗方法操作規(guī)程》印發(fā)給你們,請通知各級各類醫(yī)療機(jī)構(gòu)遵照執(zhí)行。同時對出、凝血時間檢驗方法提出如下要求:
一、停止使用出血時間測定項目的Duke法,但出血時間的檢驗項目不廢除。若臨床懷疑血管壁異常所致出血性疾病時(如血管性血友病、單純性紫癜、過敏性紫癜等),可使用出血時間測定器法檢測出血時間。
二、停止使用凝血時間測定玻片法和毛細(xì)血管法,用活化部分凝血活酶時間(APTT)或全血凝固時間(CT,試管法)測定進(jìn)行替代。
三、停止使用一般外科手術(shù)前的常規(guī)出血時間檢測,用活化部分凝血活酶時間(APTT)、血漿凝血酶原時間(PT)和血小板計數(shù)(PLT)聯(lián)合檢測取代,如臨床有出血史時另加出血時間測定器法進(jìn)行出血時間檢測。
請將以上要求及時通知到各級各類醫(yī)療機(jī)構(gòu)。在實施過程中,有條件的醫(yī)療機(jī)構(gòu)要盡快達(dá)到上述要求。條件尚不具備的,必須在2001年12月31日前達(dá)到要求。
附件:
出、凝血時間檢驗方法操作規(guī)程
(2001年1月18日衛(wèi)生部辦公廳更正)
全文
一、出血時間(測定器法)
(一)器材
1.血壓計
2.出血時間測定器:為雙刀片彈簧裝置,兩把刀片每片長均為6mm,深為1mm.
3.干凈濾紙
4.秒表
(二)操作
1.血壓計袖帶縛于上臂,加壓。成人維持在5.3kpa(40mmHg),兒童維持在2.6kpa(20mmHg)處。
2.在肘前窩凹下二橫指處常規(guī)消毒,輕輕繃緊皮膚,避開血管、疤痕、水腫,置出血時間測定器使它貼于皮膚表面,注意刀片的長度與前臂相平行,按其按鈕,使刀片由“測定器”內(nèi)刺入皮膚,啟動秒表。
3.每隔半分鐘,用干凈濾紙吸取流出血液,直至出血自然停止,按停秒表計時。
(三)參考值:6.88±2.08min
二、全血凝固時間測定(CT,試管法)
(一)原理
靜脈血離體后至完全凝固所需的時間,它是反映內(nèi)源系統(tǒng)凝血活性的篩選試驗。
(二)操作
1.取內(nèi)徑為8mm小試管3支,編號1、2、3.
2.順利地抽取待測者靜脈血3ml,自血流入針頭開始計時,去針頭后沿管壁每管緩慢注入血液1.0ml,置37℃水浴中。
3.3min后,每隔半分鐘將第一管傾斜1次,直至將試管倒置血液不流動為止;再依次觀察第二管,第二管凝固后,再觀察第三管。以第三管凝固時間為凝血時間。
(三)參考值:4~12min
三、活化部分凝血活酶時間測定(APTT)
(一)原理
在37℃下以白陶土激活因子XII和XI,以腦磷脂(部分凝血活酶)代替血小
2+板提供凝血的催化表面,在Ca 參與下,觀察乏血小板血漿凝固所需時間。是內(nèi)源凝血系統(tǒng)較敏感和常用的篩選試驗。
(二)試劑
1.待測血漿及正常對照血漿:以109mmol/L枸櫞酸鈉溶液作1∶9抗凝,3000r/min離心10min,獲乏血小板血漿。應(yīng)使用塑料試管,防止血小板激活。
2.40g/L白陶土-腦磷脂的混懸液。
3.0.025mol/L氯化鈣溶液。
(三)操作
1.取待測血漿、白陶土-腦磷脂的混懸液各0.1ml,混勻,置37℃水浴溫育3min,其間輕輕搖蕩數(shù)次。
2.加入經(jīng)預(yù)溫至37℃的0.025mol/L氯化鈣溶液0.1ml,立即開啟秒表,置水浴中不斷振搖,約30s時取出試管,觀察出現(xiàn)纖維蛋白絲的時間,重復(fù)兩次取平均值。
3.同時按上法測定正常對照。
(四)參考值:男性31.5-43.5s,女性32-43s.待測者的測定值較正常對照值延長超過10s以上才有病理意義。
四、血漿凝血酶原時間測定(PT,-期法)
(一)原理
2+
在待檢血漿中加入過量的組織凝血活酶浸出液和Ca ,使凝血酶原轉(zhuǎn)變?yōu)槟福笳呤估w維蛋白原轉(zhuǎn)變?yōu)槔w維蛋白。它不僅反映凝血酶原水平,也是反映因子V、VII、X和纖維蛋白原在血漿中的水平,故是外源性凝血系統(tǒng)的篩選試驗。
(二)器材和試劑
1.組織凝血活酶浸出液:常用人或兔腦粉浸出液;
2.0.025mol/L氯化鈣溶液;
3.秒表、塑料試管、塑料注射器。
(三)操作
1.在試管內(nèi)加入109mmol/L枸櫞酸鈉溶液0.2ml,然后加入待檢者血(或正常對照)1.8ml,混勻,高速離心,分離血漿。
2.取小試管1支,加入待測血漿和組織凝血活酶浸出液各0.1ml,37℃預(yù)溫,再加入0.025mol/L氯化鈣溶液0.1ml(氯化鈣液也應(yīng)預(yù)溫在37℃水浴中),立即開啟秒表,不斷輕輕傾斜試管,記錄至液體停止流動所需要的時間。重復(fù)以上操作2-3次,取平均值,即為凝血酶原時間。
3.同時按上法測定正常對照。
(四)計算
由于不同來源、不同制備方法的組織凝血活酶對結(jié)果影響很大,造成結(jié)果可比性很差,特別影響判斷治療效果。WHO提出以人腦凝血活酶67/40批號作為標(biāo)準(zhǔn)品,并以國際敏感度指數(shù)(international sensitivity index,ISI)表示各種制劑與67/40之間相互關(guān)系。67/40為原始參考品,定ISI為1.0.因此各種制劑必須標(biāo)以ISI值。國外現(xiàn)在采用國際標(biāo)準(zhǔn)化(凝血酶原時間)比值(international normalize-dratio,INR)統(tǒng)一判斷治療效果,以INR控制在2-4時為抗凝治療適當(dāng)范圍。為
ISI此必須通過該組織凝血活酶的ISI,經(jīng)下列公式計算:INR=PTR PTR:凝血酶原時間比值。
備注:PT、APTT的儀器測定操作方法根據(jù)儀器、試劑說明書的要求進(jìn)行。
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