各省、自治區、直轄市衛生廳（局），新疆生產建設兵團衛生局：

　　經專家論證并經我部審核同意，現將《出、凝血時間檢驗方法操作規程》印發給你們，請通知各級各類醫療機構遵照執行。同時對出、凝血時間檢驗方法提出如下要求：

　　一、停止使用出血時間測定項目的Duke法，但出血時間的檢驗項目不廢除。若臨床懷疑血管壁異常所致出血性疾病時（如血管性血友病、單純性紫癜、過敏性紫癜等），可使用出血時間測定器法檢測出血時間。

　　二、停止使用凝血時間測定玻片法和毛細血管法，用活化部分凝血活酶時間（APTT）或全血凝固時間（CT，試管法）測定進行替代。

　　三、停止使用一般外科手術前的常規出血時間檢測，用活化部分凝血活酶時間（APTT）、血漿凝血酶原時間（PT）和血小板計數（PLT）聯合檢測取代，如臨床有出血史時另加出血時間測定器法進行出血時間檢測。

　　請將以上要求及時通知到各級各類醫療機構。在實施過程中，有條件的醫療機構要盡快達到上述要求。條件尚不具備的，必須在2001年12月31日前達到要求。

　　附件：

出、凝血時間檢驗方法操作規程

　　（2001年1月18日衛生部辦公廳更正）

　　全文

　　一、出血時間（測定器法）

　　（一）器材

　　1.血壓計

　　2.出血時間測定器：為雙刀片彈簧裝置，兩把刀片每片長均為6mm，深為1mm.

　　3.干凈濾紙

　　4.秒表

　　（二）操作

　　1.血壓計袖帶縛于上臂，加壓。成人維持在5.3kpa（40mmHg），兒童維持在2.6kpa（20mmHg）處。

　　2.在肘前窩凹下二橫指處常規消毒，輕輕繃緊皮膚，避開血管、疤痕、水腫，置出血時間測定器使它貼于皮膚表面，注意刀片的長度與前臂相平行，按其按鈕，使刀片由“測定器”內刺入皮膚，啟動秒表。

　　3.每隔半分鐘，用干凈濾紙吸取流出血液，直至出血自然停止，按停秒表計時。

　　（三）參考值：6.88±2.08min

　　二、全血凝固時間測定（CT，試管法）

　　（一）原理

　　靜脈血離體后至完全凝固所需的時間，它是反映內源系統凝血活性的篩選試驗。

　　（二）操作

　　1.取內徑為8mm小試管3支，編號1、2、3.

　　2.順利地抽取待測者靜脈血3ml，自血流入針頭開始計時，去針頭后沿管壁每管緩慢注入血液1.0ml，置37℃水浴中。

　　3.3min后，每隔半分鐘將第一管傾斜1次，直至將試管倒置血液不流動為止；再依次觀察第二管，第二管凝固后，再觀察第三管。以第三管凝固時間為凝血時間。

　　（三）參考值：4～12min

　　三、活化部分凝血活酶時間測定（APTT）

　　（一）原理

　　在37℃下以白陶土激活因子XII和XI，以腦磷脂（部分凝血活酶）代替血小

　　2＋板提供凝血的催化表面，在Ca　　參與下，觀察乏血小板血漿凝固所需時間。是內源凝血系統較敏感和常用的篩選試驗。

　　（二）試劑

　　1.待測血漿及正常對照血漿：以109mmol／L枸櫞酸鈉溶液作1∶9抗凝，3000r／min離心10min，獲乏血小板血漿。應使用塑料試管，防止血小板激活。

　　2.40g／L白陶土－腦磷脂的混懸液。

　　3.0.025mol／L氯化鈣溶液。

　　（三）操作

　　1.取待測血漿、白陶土－腦磷脂的混懸液各0.1ml，混勻，置37℃水浴溫育3min，其間輕輕搖蕩數次。

　　2.加入經預溫至37℃的0.025mol／L氯化鈣溶液0.1ml，立即開啟秒表，置水浴中不斷振搖，約30s時取出試管，觀察出現纖維蛋白絲的時間，重復兩次取平均值。

　　3.同時按上法測定正常對照。

　　（四）參考值：男性31.5－43.5s，女性32－43s.待測者的測定值較正常對照值延長超過10s以上才有病理意義。

　　四、血漿凝血酶原時間測定（PT，－期法）

　　（一）原理

　　2＋

　　在待檢血漿中加入過量的組織凝血活酶浸出液和Ca　　，使凝血酶原轉變為凝血酶，后者使纖維蛋白原轉變為纖維蛋白。它不僅反映凝血酶原水平，也是反映因子V、VII、X和纖維蛋白原在血漿中的水平，故是外源性凝血系統的篩選試驗。

　　（二）器材和試劑

　　1.組織凝血活酶浸出液：常用人或兔腦粉浸出液；

　　2.0.025mol／L氯化鈣溶液；

　　3.秒表、塑料試管、塑料注射器。

　　（三）操作

　　1.在試管內加入109mmol／L枸櫞酸鈉溶液0.2ml，然后加入待檢者血（或正常對照）1.8ml，混勻，高速離心，分離血漿。

　　2.取小試管1支，加入待測血漿和組織凝血活酶浸出液各0.1ml，37℃預溫，再加入0.025mol／L氯化鈣溶液0.1ml（氯化鈣液也應預溫在37℃水浴中），立即開啟秒表，不斷輕輕傾斜試管，記錄至液體停止流動所需要的時間。重復以上操作2－3次，取平均值，即為凝血酶原時間。

　　3.同時按上法測定正常對照。

　　（四）計算

　　由于不同來源、不同制備方法的組織凝血活酶對結果影響很大，造成結果可比性很差，特別影響判斷治療效果。WHO提出以人腦凝血活酶67／40批號作為標準品，并以國際敏感度指數（international　sensitivity　index，ISI）表示各種制劑與67／40之間相互關系。67／40為原始參考品，定ISI為1.0.因此各種制劑必須標以ISI值。國外現在采用國際標準化（凝血酶原時間）比值（international　normalize－dratio，INR）統一判斷治療效果，以INR控制在2－4時為抗凝治療適當范圍。為

　　ISI此必須通過該組織凝血活酶的ISI，經下列公式計算：INR＝PTR　　　PTR：凝血酶原時間比值。

　　備注：PT、APTT的儀器測定操作方法根據儀器、試劑說明書的要求進行。